Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Экспансия полуавтоматически обработанных стволовых клеток, полученных из жировой ткани человека, в среде, дополненной аутологичной сывороткой и антиоксидантами

Ли-И Сун, Дянь-Кун Ли, Пао-Джень Чен, Ю-Ю Джойс Хо, Джон-Сон Куо, Чинг-Фэн Ченг, Куэй-Фан Ли, Яо-Джен Чанг и Ченг-Юнг Панг

Цель: Иссеченная жировая ткань (EFT) является отличным источником стволовых клеток, полученных из жировой ткани (ADSC), для аутологичной клеточной терапии. Однако существующая методика иссечения жировых тканей обычными хирургическими ножницами и использования культуральной среды, содержащей сыворотку плода крупного рогатого скота (FBS), может не соответствовать рекомендациям по надлежащей тканевой практике (GTP). Таким образом, мы разработали полуавтоматический процесс, соответствующий вышеупомянутым рекомендациям, для производства ADSC клинического класса из небольших объемов EFT. Методы: Был разработан полуавтоматический процесс с использованием одноразовой диспергирующей трубки, работающей на рабочей станции диспергирования трубок, для получения стромально-васкулярной фракции (SVF) из EFT. Культуральная среда, дополненная человеческой аутологичной сывороткой (HAS) и адъювантом культуры мезенхимальных стволовых клеток (MCA), состояла из основного фактора роста фибробластов (bFGF/FGF-2) и антиоксидантов, была сформулирована для расширения ADSC из SVF in vitro. Результаты: Полуавтоматизированный процесс может значительно повысить выход клеток и сократить время операции по измельчению тканей с часа до нескольких минут. Рост ADSC был медленнее в среде 10% HAS, чем в среде с добавлением FBS, но их рост в среде 10% HAS, содержащей MCA (10% HAS+MCA), превосходил обе среды. Среда 10% HAS+MCA также способствовала адипогенезу, остеогенезу, хондрогенезу и увеличивала экспрессию CD44, CD73 и генов стволовости в ADSC. Заключение: Наш новый полуавтоматизированный процесс обеспечивает эффективную изоляцию SVF, а среда 10% HAS+MCA ускоряет рост ADSC из небольших количеств EFT без потери их способности к дифференцировке.