Мишель Д де Оливейра, Андре С де Оливейра, Нина Р. Дутра, Рафаэль Ф.О. Франса, Эдуардо Р. Хонда, Фернандо Б. Занки, Кловис А. Невес, Синтия К. да Силва, Бенедито Аль да Фонсека и Сержиу О Де Паула
Несколько попыток разработать вакцины против лихорадки денге на основе рекомбинантных субъединиц потерпели неудачу из-за недостаточного уровня экспрессии и неправильного сворачивания белка E. Чтобы проверить важность белка-предшественника мембраны для уровня экспрессии белка E, мы сконструировали две рекомбинантные плазмиды, клонировав полноразмерную последовательность гена prM из штаммов вируса денге-2 и денге-3 в плазмиду, которая экспрессирует укороченную версию белка E вируса денге-2. Затем мы оценили эти две конструкции на предмет их влияния на уровень экспрессии белка E in vitro. Наши результаты показали, что обе плазмиды обеспечивали правильную экспрессию белка E, поскольку экспрессия белка E была обнаружена в трансфицированных клетках Vero, что было продемонстрировано с помощью непрямой иммунофлуоресценции и иммуноблоттинга. Денситометрический анализ вестерн-блотов клеточных экстрактов показал на 67,02% более высокую экспрессию белка E в клетках, трансфицированных pCID2EtD3prM, что указывает на то, что последовательность prM вируса денге-3 может быть более эффективной в содействии правильной обработке белка E. Результаты этого исследования могут быть использованы для увеличения in vitro продукции антигена белка E для использования в вакцинах и в диагностических целях.