Журнал микробных и биохимических технологий

Абстрактный

Оксидаза L-аминокислоты Aspergillus fumigatus — двухэтапная очистка и характеристика фермента

Сусмита Сингх, Бинод Кумар Гогой и Раджиб Лочан Безбаруа

Оксидаза L-аминокислот (L-aao), полученная из Aspergillus fumigatus, была очищена с помощью ионообменной и гель-фильтрационной хроматографии. Выход L-aao в ионообменной хроматографии составил 24,40%, в то время как извлечение очищенного L-aao с помощью гель-фильтрации составило 18,70% сырого фермента. Молекулярная масса очищенного фермента была оценена в 55 кДа с помощью SDS PAGE и 93 кДа с помощью гель-фильтрации. Фермент был стабилен до 40ºC и в широком диапазоне pH 5,6-9,2. Фермент имеет более высокую специфичность к гидрофобным ароматическим L-аминокислотам, а именно тирозину и фенилаланину. Кинетические параметры, Km и Vmax были определены как 43,47 мМ и 0,0434 мкмоль/мин/мл соответственно. Десять мМ бензойной кислоты и ЭДТА полностью ингибировали фермент, в то время как минимальное ингибирование наблюдалось с глицином (29,56%) и α-нафтолом (12,4%). Рибофлавин, азид натрия и 8-гидроксихинолин ингибируют фермент до 44,89%, 49,63% и 70,07% соответственно. MgSO4 при 10-4 М и 10-3 М увеличил активность фермента в 1,72 и 2,22 раза соответственно, в то время как CuSO4 при 10-3 М увеличил активность в 1,65 раза. Это первый отчет об очистке L-aao от Aspergillus fumigatus.