Наследственная генетика: текущие исследования

Абстрактный

ИФА для определения охратоксина А с помощью моноклональных антител к охратоксину А или фрагмента F(ab')2

Явор Иванов

Аннотация
Охратоксиныявляются возможными канцерогенами человека, и разработка чувствительного иммуноферментного анализа для его определения в пищевых продуктах является очень важной задачей. Целью данного исследования была разработка чувствительного ИФА на основе мышиных моноклональных антител (мАТ) против охратоксина А (ОТА) или его фрагмента F(ab')2. Мышиные МАТ были получены in vitro с использованием методов культивирования тканей. Была измерена активность полученных анти-ОТА МАТ. Фрагмент F(abʹ)2 анти-ОТА МАТ был получен путем гидролиза пепсином полученных МАТ. Непрямой ИФА был выполнен с использованием полученного фрагмента F(ab')2 и анти-ОТА МАТ. Было использовано вторичное антитело, меченное пероксидазой. Аналитические характеристики непрямого ИФА с фрагментом F(abʹ)2 были сравнены с характеристиками с МАТ. Линейный диапазон ОТА в фосфатном буфере при иммуноанализе с фрагментом F(ab')2 составил от 0,1 до 100 нг/мл. Линейный диапазон иммуноанализа с целым анти-ОТА mAb составил от 0,1 до 10 нг/мл. Полученные результаты сравнивали с сертифицированными мышиными mAb против охратоксина А. Линейный диапазон с сертифицированным mAb составил от 1 до 500 нг/мл. Разработанные ИФА с полученным фрагментом F(abʹ)2 или полученными анти-ОТА mAb имеют возможность измерять низкую концентрацию ОТА.