Журнал мембранных наук и технологий

Абстрактный

Влияние внутриклеточного хелатора цинка in vivo на транспорт таурина, концентрацию таурина и транспортер таурина в клетках сетчатки крысы

Асари Маркес, Мэри Урбина, Мануэлита Квинталь, Франсиско Обрегон и Люсимей Лима

Таурин и цинк, высококонцентрированные в сетчатке, оказывают нейротрофическое действие на центральную нервную систему. Цинк модулирует Na+/Cl-зависимые транспортеры, такие как транспортеры дофамина и таурина (TAUT) in vitro, хотя нет никаких доказательств эффектов цинка in vivo. Целью настоящего исследования была оценка последствий дефицита цинка на уровни и транспорт таурина, а также уровни мРНК TAUT в сетчатке крыс. Различные концентрации внутриклеточного хелатора цинка, N,N,N,N-тетракис-(2-пиридилметил) этилендиамина (TPEN), растворенного в диметилсульфоксиде, вводились внутриглазно для выбора дозы: 1, 2,5 и 5 нМ (конечные концентрации 12,5, 31,25 и 62,5 нМ). Разведение в глазу составляет примерно 25 раз. Оно учитывает объем глаза, 12,5 мкл). Сетчатки были препарированы через 3, 5 и 10 дней. Цинк определялся спектрофотометрией. Введение TPEN, 5 нМ, снизило цинк на 67% на 5 день. Уровни таурина, определенные высокоэффективной жидкостной хроматографией с флуоресцентной детекцией, составили 65,96 ± 4,73 нмоль/мг белка в ткани, 44,34 ± 5,55 в изолированных клетках и 6,63 ± 1,12 в клеточных мембранах. Мощность транспорта таурина с использованием [3H]таурина снизилась на 38%, а сродство увеличилось на 50% после TPEN. Уровни мРНК TAUT, по данным ОТ-ПЦР, были снижены на 50% хелатором. Оптимальные концентрации цинка необходимы для равновесия тауриновой системы в сетчатке, что включает концентрацию таурина, транспорт таурина и уровни мРНК TAUT.