Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Дифференциальное влияние аллельных ошибок HLA-B*44 в позиции 156 на специфичность связывания пептидов и разнообразие Т-клеток

Сумья Бадринат, Тревор Хайтон, Хайке Кунце-Шумахер, Хольгер Андреас Эльснер, Райнер Блащик и Кристина Баде Дединг

Молекулярное понимание того, как мы можем не совпадать у пациентов и доноров и при этом иметь успешные клинические результаты, поможет направлять будущее неродственной трансплантации костного мозга. Было описано, что несовпадения отдельных аминокислот в позиции 156 на спирали альфа 2 вариантов B*44 вызывают иммунологические эпизоды. Величина пермиссивности между вариантами B44/156 отличается от презентации пептида, независимой от комплекса загрузки пептида (B*44:28), до влияния на клинические эпизоды (B*44:02 против B*44:03). Здесь мы исследовали, может ли единичный обмен Asp>Glu, происходящий в B*44:35 в остатке 156, вызвать иммунный ответ in vitro. Мы разработали систему in vitro путем рекомбинантной совместной экспрессии одной связанной с мембраной аллогенной молекулы HLA класса I в донорских клетках и совместной инкубации этих клеток с аутологичными Т-клетками. Эта стратегия позволяет изучать отдельные несовпадения HLA класса I и исключает влияние второстепенных антигенов. Мы обнаружили, что эти Т-клетки способны дифференциально различать несовпадающие подтипы B*44 и их микрополиморфизм. Чтобы понять, как определенные ландшафты pHLA формируют аллореактивный иммунный ответ, мы секвенировали отдельные пептиды, полученные из подтипов B*44/156, с помощью технологии LC-ESI-MS/MS. На основе данных о пептидах мы смоделировали структуру варианта B*44:35 и можем описать неожиданную иммунологическую реакцию несовпадающих подтипов B*44 посредством структурной манипуляции тяжелой цепи. Тщательная характеристика профилей связывания пептидов для ключевых аллелей, а также оценка ответов Т-клеток и структурный анализ в контексте несовпадений одного аллеля откроют дверь в новую эру в трансплантации костного мозга.