Журнал микробных и биохимических технологий

Абстрактный

Диабет II типа, связанный с анемией

Люльета Хетеми

Введение:

Целью данного исследования было: наблюдение за пациентами с диабетом 2 типа посредством тестирования: производных гликированного гемоглобина (HbA1c), но важность метода ВЭЖХ во время тестирования HbA1c в: диагностике, мониторинге, последующем наблюдении, доступе к терапии диабета 2 типа также получены результаты от: диабета, преддиабета, введения инсулина пациенту, монотерапии, но также и обнаружение аномальных форм HgB у пациентов с диабетом, таких как гемоглобинопатии, и в ходе исследования мы обнаружили, что диагностическая ориентация посредством теста HbA1c с ВЭЖХ при некоторых патологиях, которая была как профилактической, так и диагностической при других патологиях. Исследование длилось более 1 года в медицинском и лабораторно-диагностическом центре Olive.

Метод:

HPLC (высокоэффективная жидкостная хроматография) G8 Tosoh, эксклюзивный дистрибьютор: Keis group pharmaceutical Косово. Впервые в нашей стране мы провели HbA1c с помощью HPLC. Анализатор G8 — это следующее поколение ведущих систем тестирования HPLC Tosoh для быстрых и точных результатов HbA1c. Анализатор разбавляет образец цельной крови раствором для гемолиза и промывки, а затем вводит небольшой объем обработанного образца в колонку TSKgel Glyco HSi Variant. Разделение достигается за счет использования различий в ионном взаимодействии между катионообменной группой на поверхности смолы колонки и компонентами гемоглобина в ступенчатом градиентном элюировании. Фракции гемоглобина (обозначенные как A1a, A1b, F, LA1c, SA1c, A0 и H-V0, H-V1, H-V2) впоследствии удаляются из материала колонки путем выполнения поэтапного элюирования с использованием буферов элюирования HSi Variant 1, 2 и 3, которые имеют определенные концентрации соли и pH. Разделенные компоненты гемоглобина проходят через проточную ячейку светодиодного фотометра, где изменения поглощения измеряются при 415 нм. Программное обеспечение G8 интегрирует и редуцирует необработанные данные, а затем вычисляет относительные проценты каждой фракции гемоглобина. Распечатка состоит из числовых результатов и хроматограммы. Она представляет собой изменения поглощения в зависимости от времени удерживания для каждой пиковой фракции. Анализ занимает всего 1,6 минуты. Исследование проводилось на 150 пациентах, из которых 80% страдали диабетом II типа, в возрасте 40–65 лет, с уровнем HbA1c в диапазоне 6,9–11%, уровнем HbA от 6 до 8, уровнем HbF более 1–8% (в 48% случаев уровень HbF был положительным), контрольную группу составляли пациенты без диабета, с подозрением на дислипидемию, без признаков диабета II типа, причиной тестирования была высокая или умеренная инсулинорезистентность, некоторые из этих пациентов страдали синдромом поликистозных яичников. В дополнение к абсолютной точности метода ВЭЖХ при тестировании HbA1c, в этом исследовании мы обнаружили HbF положительный у пациентов с диабетом II типа, что приводит нас к анемии, и причиной этой анемии считается нарушение функции почек, такое как диабетическая нефропатия - осложнение диабета II типа, но все еще неясный механизм между аномальным врожденным HbF и диабетом II типа останется нераскрытым, поскольку мы не смогли проверить всех пациентов на электрофорез Hb. Из этих лабораторных результатов следует, что HbF приводит к повышенной патологии: помимо того, что это врожденная форма, его повышенный уровень также был обнаружен в случаях пернициозной анемии, гемолитической анемии, талассемии, тиреотоксикоза, тромбоза глубоких вен и т. д. LA1c, как лабильная форма гликированного Hb, может повышаться в случае присутствия карбамилированного Hb (мочевина, пациенты с заболеваниями почек) и ацетилированного Hb (злоупотребление алкоголем, заболевания печени и т. д.), что, конечно, приводит к повышению уровня глюкозы в крови.

 Когда уровень глюкозы в крови высок, молекулы глюкозы прикреплены к эритроцитам, чем дольше длится гипергликемия, тем больше глюкозы связывается с Hb, и выше гликированный Hb. Таким образом, в этом исследовании мы обнаружили примерно 35% случаев с положительным LA1c, когда диабетическая нефропатия уже началась, что было подтверждено положительной микроальбуминурией и заключением врача-нефролога. Аномальные формы значений HbF в нашей стране, и в этих 150 случаях не было других аномальных форм Hb, поэтому, с другой стороны, мы обнаружили корреляцию между положительным HbF, имевшим легкое или умеренное повышение уровня гомоцистеина в сыворотке или гипергомоцистеинемию, и 10% из них были с положительным мутантом MTHFR (около 15% этих пациентов, которые имели возможность пройти тестирование, их лабораторные результаты были значениями сывороточного гомоцистеина от 15 до 17, референсный диапазон для взрослых 5-15 мкмоль/л, метод иммуноферментного анализа - анализаторы Imulite-2000 для количественного определения L-гомоцистеина в сыворотке человека (Siemens), и другие анамнестические данные этих случаев были частично с клиническими признаками, такими как отек ног и боль в ногах, поэтому, как мы знаем, гипергомоцистеин является индикатором сердечно-сосудистых заболеваний, ишемической болезни сердца, раннего артериосклеротического заболевания, артериальной тромбоэмболии, и этот риск присутствует Гиперхолестеринемией, а также гомоцистинурией как генетическими дефектами.

Результаты:

Общий гомоцистеин (tHcy) стал важным фактором риска при оценке сердечно-сосудистых заболеваний. tHcy - это аминокислота, содержащая тиол, которая вырабатывается путем внутриклеточного деметилирования метионина, таким образом, Hcy служит пулом, который позже может быть извлечен для использования в повторном производстве либо метионина посредством действия фолат-зависимого фермента метионинсинтазы, либо цистеина с использованием пути транссульфурации, зависимого от B6, фолат и B6 - это еще одна причина связи анемии с диабетом II типа, поскольку присутствует положительная форма HBF, которая указала нам на необходимость проведения все большего количества тестов, поэтому они заставили нас обратиться за консультацией к сосудистому хирургу, ему требуется MTHFR с 2 мутациями и другими тестами на гемостаз. Результаты мутаций MTHFR были получены из лаборатории Synlab в Германии. Мутация MTHFR c677T в 11% этих случаев была мутантно-положительной.

Заключение:

Мы пришли к выводу, что ВЭЖХ можно смело назвать золотым стандартом диагностического метода, поскольку он оказался лучшим методом. Риск преддиабета составил 20% наших пациентов со значениями HbA1c от 6 до 6,4%, около 10% наших пациентов имели значения HbA1c более 6,5%, впервые прошедших тестирование, которые считают диабетиком, около 25% имели адекватный контроль со значениями 6,6–7% и неадекватный контроль согласно ADA (американским критериям диабетической ассоциации) со значениями HbA1c 7–8%, около 45% из них. В механизме, основанном на результатах HBF и результатах HbA1c, с помощью ВЭЖХ тот же пациент с диабетом может получить раннюю диагностику осложнений диабета, таких как поражение почек, поражение печени, анемия, ранний артериосклероз, тромбоэмболия, риск ИЦВ и т. д.