Журнал бактериологии и паразитологии

Абстрактный

Разработка чувствительной вложенной ПЦР в реальном времени для диагностики острой и хронической фаз токсоплазмоза на мышиной модели

Париса Мусави, Хосейн Миренди, Хосейн Кешаварз Валиан, Саид Шоджаи, Ширзад Фаллахи, Армин Фарханг, Мохаммад-Али Мохагег и Расул Джафари

Toxoplasma gondii — внутриклеточный паразит, вызывающий различные клинические проявления. Острые и хронические фазы токсоплазмоза рассматриваются как наличие активно пролиферирующих тахизоитов в ядросодержащих клетках млекопитающих-хозяев, таких как люди, и распространение через кровь в другие части тела, что впоследствии образует тканевые цисты. Настоящее исследование было направлено на оценку диагностической ценности вложенной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени для острой и хронической фаз токсоплазмоза у лабораторных мышей с использованием по сравнению с обычной ПЦР в реальном времени. Для того чтобы вызвать острый токсоплазмоз, 103 тахизоита штамма Toxoplasma gondii RH были внутрибрюшинно инокулированы 25 мышам BALB/c. Для того чтобы вызвать хронический токсоплазмоз, мышей подкожно заражали паразитом, а затем лечили сульфадиазином с первого по 14 день после инъекции. Геномная ДНК была извлечена из крови и мозговых тканей. Была проведена ПЦР в реальном времени и вложенная ПЦР в реальном времени с целью 529 п.н. повторяющегося элемента (RE). Все мыши с острой инфекцией были положительными на Toxoplasma gondii с использованием вложенной ПЦР в реальном времени, а 21 была положительной с помощью ПЦР в реальном времени. В хронической фазе все образцы крови были отрицательными с помощью ПЦР в реальном времени, а три были положительными с помощью вложенной ПЦР в реальном времени. Однако из 25 образцов мозга 28%, 52% и 72% были положительными с помощью микроскопического, ПЦР в реальном времени и вложенной ПЦР в реальном времени, соответственно. Результаты настоящего исследования показали, что молекулярные методы обладают высокой чувствительностью для диагностики острого токсоплазмоза. В хронической фазе образец крови не подходит для обнаружения инфекции, и вместо него можно использовать другие образцы тканей. Кроме того, вложенная ПЦР в реальном времени имеет еще более высокую чувствительность по сравнению с обычной ПЦР в реальном времени.