Тангарадж Секар*, Ганесан Чандра Мохан, Читрамбалам Паланиаппан, Ананда Ароне Премкумар, Бхиман Сундаран и Балараман Секар
Вакцина против бешенства готовится с помощью технологии культивирования клеток, и эти вакцины не имеют многих побочных эффектов по сравнению с вакцинами из нервной ткани. Производство вакцины представляет собой непрерывный процесс, включающий размножение вируса, сбор, концентрацию, инактивацию, очистку и формулирование с консервантами. Количественное определение вирусного белка в промежуточном биологическом продукте является внутрипроизводственным контролем качества для снижения потерь продукта в ходе различных процессов производства вакцины. Традиционные тесты in vivo и in vitro, используемые для количественного определения вирусного белка бешенства, требуют много времени, трудоемки и использования лабораторных животных. В этом исследовании мы попытались разработать внутренние серологические методы, такие как сэндвич-ИФА, точечный блот для обнаружения и количественного определения антигена бешенства в промежуточном биологическом материале во время приготовления вакцины. Гипериммунные сыворотки были приготовлены путем иммунизации двух животных-моделей, т. е. морских свинок и кроликов, стандартным антигеном бешенства. Образцы сыворотки были очищены путем насыщенного осаждения сульфатом аммония и далее с помощью гелевой колонки G50. Титр антител к бешенству в очищенном препарате оценивали с помощью быстрого теста ингибирования флуоресцентного фокуса (RFFIT). Национальная референтная вакцина против бешенства, полученная из Центральной лаборатории лекарственных препаратов в Касаули, использовалась для приготовления местного референтного стандарта и была включена во внутренние серологические методы для проверки анализа. Наши внутренние тесты оказались простыми, быстрыми и экономически эффективными и требуют меньше времени по сравнению с in vivo-заражением животных и in vivo-тестами на основе клеточной культуры.