Журнал бактериологии и паразитологии

Абстрактный

Разработка и тестирование пробных образцов для специфической серодиагностики Fasciola gigantica с помощью внешней оценки качества

Ву Куанг Хи, Чан Тхиен Чунг, Ха Мань Туан, Ву Чи Тхань, Ле Ван Чуонг, Нгуен Лам Дык Ву, Хюинь Тхи Дием Фук, Буй Куанг Санг

Цель: Разработать процедуру получения образцов для специфической серодиагностики антител к Fasciola gigantica с использованием внешней схемы оценки качества, а также оценить однородность и стабильность пробных образцов.

Методы: В этом экспериментальном исследовании образцы содержали антитела к Fasciola gigantica согласно скринингу методом ELISA, с последующим подтверждением методом вестерн-блоттинга. Все образцы были протестированы и признаны отрицательными на наличие антител к другим гельминтам, особенно на наличие антител к трематодам. Образцы также были отрицательными на наличие антител к ВИЧ-1 и -2, антител к HCV и антигена HBs. Образцы были подготовлены методами сублимационной сушки и замораживания, стабильность и однородность оценивались каждые 2, 4, 8, 12 и до 24 недель.

Результаты: Мы получили три партии образцов сыворотки, содержащих антитела против Fasciola gigantica на трех уровнях. Партия DK1 имела оптическую плотность, OD=0,350 ± 0,037; партии DK3 и DL3 имели O=0,653 ± 0,046, а партия DL1 имела OD=0,850 ± 0,047 при длине волны 450 нм. Специфические антитела IgG против антигенов Fasciola gigantica были обнаружены положительными для всех трех белков, белка 8–9 кДа (P 8-9), 28 кДа (P 28) и 42 кДа (P 42) методом вестерн-блоттинга. Было подтверждено, что образцы для испытаний были гомогенными с помощью теста Фишера (F-статистика 0,05), а также стабильными в течение 24 недель (со статистикой t 0,05).

Заключение: Пробные образцы для специфической серодиагностики антител к Fasciola gigantica с помощью внешней оценки качества могут быть получены с однородностью и стабильностью, сохраняющейся в течение 24 недель, с помощью методов сублимационной сушки и замораживания.