Фучжоу Сюй, Симинь Цзэн и Цзюнь Линь
Campylobacter jejuni является ведущей бактериальной причиной человеческого энтерита во многих промышленно развитых странах. На сегодняшний день не существует коммерческой вакцины против C. jejuni. CmeC является важным компонентом внешней мембраны многокомпонентного эффлюксного насоса CmeABC, который играет решающую роль в устойчивости к антибиотикам и колонизации C. jejuni in vivo. CmeC преобладает в штаммах C. jejuni и резко индуцируется и иммуногенен in vivo. В этом исследовании мы проанализировали гомологию последовательности CmeC, изучили in vitro иммунную защиту антител к пептиду CmeC и создали полноразмерный рекомбинантный CmeC (rCmeC) для оценки иммуногенности и защитной эффективности вакцины субъединицы CmeC против C. jejuni с использованием куриной модельной системы. Были определены аминокислотные последовательности CmeC из 24 различных штаммов C. jejuni, которые были подвергнуты выравниванию, что показало, что CmeC высококонсервативен в C. jejuni с идентичностью в диапазоне от 97,3% до 100%. Антитела к пептиду CmeC ингибировали функцию эффлюксного насоса CmeABC и повышали восприимчивость C. jejuni к желчным солям, естественному антимикробному средству, присутствующему в кишечнике. Два полноразмерных белка rCmeC с N- или C-концевой His-меткой были получены в E. coli; rCmeC с N-концевой His-меткой с высокой чистотой и выходом был получен путем одноэтапной аффинной очистки. Очищенный rCmeC использовался в двух испытаниях вакцинации с использованием куриной модели инфекции C. jejuni. Стимуляция CmeC-специфических сывороточных IgG-ответов посредством пероральной вакцинации потребовала иммунизации более высокими дозами rCmeC (200 мкг) вместе с 70 мкг мукозального адъюванта mLT (модифицированный термолабильный энтеротоксин E. coli). Подкожная вакцинация цыплят rCmeC заметно стимулировала как сывороточные IgG-, так и IgA-ответы. Однако CmeC-специфический кишечный секреторный IgA-ответ не был значительно стимулирован независимо от схемы вакцинации, а вакцинация rCmeC не обеспечивала защиту от инфекции C. jejuni. В совокупности эти результаты предоставляют дополнительные убедительные доказательства того, что CmeC является перспективным кандидатом на субъединичную вакцину против инфекции C. jejuni. Однако схему вакцинации CmeC следует оптимизировать для усиления CmeC-специфического мукозального иммунного ответа в кишечнике для защиты от C. jejuni.