Журнал биоэквивалентности и биодоступности

Абстрактный

Определение апрепитанта в плазме человека методом ЖХ-МС/МС с ионизацией электрораспылением

Рави Пракаш PVDLS, Сумадхури Б и Шрикант М

Точный, чувствительный и высокопроизводительный метод жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС/МС) для определения апрепитанта (APT) в плазме человека был разработан и проверен с использованием кветиапина (QTP) в качестве внутреннего стандарта. Аналит и внутренний стандарт были извлечены из плазмы человека с помощью экстракции жидкость-жидкость. Хроматографическое разделение было выполнено на колонке Discovery C18 10 см × 4,6 мм, 5 мкм с изократической подвижной фазой, состоящей из 5 мМ ацетата аммония (pH 4,00):ацетонитрила (10:90), при скорости потока 0,9 мл/мин. MS-MS-детектирование проводилось на тандемном масс-спектрометре AB Sciex API 3200, работающем в режиме мониторинга множественных реакций (MRM) в положительном режиме при m/z 535,10/277,10 и 384,00/253,10 для APT и QTP соответственно. Линейный динамический диапазон 10,004–5001,952 нг/мл для APT оценивался со средним коэффициентом корреляции (r) 0,9991. Точность анализа (выраженная как коэффициент вариации, CV) была менее 15% при концентрациях LQC, MQC, HQC и менее 20% для LLOQQC. Процент восстановления для APT в контрольных образцах высокого, среднего и низкого качества составил 71,9%, 68,0% и 63,8% соответственно, а для внутреннего стандарта — 77,7%. Было обнаружено, что аналит стабилен в течение пяти циклов замораживания-оттаивания, настольных исследований, влажного экстракта, сухого экстракта, автоматического пробоотборника и промежуточных исследований стабильности. Таким образом, предложенный метод оказался подходящим для рутинного анализа контроля качества апрепитанта в плазме человека в исследованиях биоэквивалентности.