Сердечно-сосудистая фармакология: открытый доступ

Абстрактный

Выявление воспалительных циркулирующих эндотелиальных клеток с использованием эндотелиальных клеток пупочной вены человека, отделенных от культуральных чашек с помощью фактора некроза опухоли-альфа, в качестве контрольных клеток

Дзюнпей Тотикубо, Наоюки Мацуда, Ёсими Ота, Томоко Хигаси, Юдай Такатани, Масато Инаба, Юши Адачи и Норихико Шия

Предыстория: Синдром системного воспалительного ответа (SIRS) с диссеминированным внутрисосудистым свертыванием (DIC) является тяжелым расстройством у пациентов в критическом состоянии и тесно связан с прогрессированием повреждения эндотелия сосудов. Ранняя диагностика необходима для предотвращения прогрессирования дисфункции органов. Циркулирующие эндотелиальные клетки (CEC) могут увеличиваться при повреждении эндотелия сосудов и играть важную роль в диагностике DIC. Однако метод обнаружения CEC не был стандартизирован. Целью данного исследования было установление метода обнаружения CEC в условиях интенсивной терапии. Мы использовали эндотелиальные клетки пупочной вены человека (HUVEC), отделенные от чашек для культивирования с помощью фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α), в качестве контрольных клеток для CEC.
Методы: Культивированные HUVEC инкубировали в среде с TNF-α (100 нг/мл), а клетки, отделенные от чашек для культивирования через 24 часа, использовали в качестве TNF-HUVEC. Молекулы клеточной поверхности нормальных HUVEC, TNF-HUVEC и клеток крови анализировались с помощью проточной цитометрии (ПЦ) для поиска подходящих маркеров для обнаружения CEC. Нормальные HUVEC и TNF-HUVEC добавлялись в кровь и обнаруживались с помощью ПЦ и метода иммунобус (ИБ) для сравнения двух методов. CEC измерялись у здоровых добровольцев и пациентов отделения интенсивной терапии (ОИТ) с помощью ПЦ.
Результаты: CD146 и CD105 были высоко экспрессированы в HUVEC и превосходили для отделения UVEC от клеток цельной крови. Средние показатели обнаружения нормальных HUVEC составили 75% при ПЦ и 82% при ИБ. Однако средние показатели обнаружения TNF-HUVEC составили 64% при ФК и 27% при ИБ (p < 0,05). Среднее количество CEC у 20 здоровых добровольцев и 16 пациентов ОИТ составило 2,8 клеток/мл и 4,3 клеток/мл соответственно. У одного пациента отделения интенсивной терапии с ДВС-синдромом, вызванным SIRS, уровень CEC был повышен на 49 клеток/мл.
Заключение: CD146 и CD105 подходят для обнаружения эндотелиальных клеток в крови. FC превосходит IB для обнаружения эндотелиальных клеток при тяжелых воспалительных состояниях.