Журнал бактериологии и паразитологии

Абстрактный

Обнаружение, идентификация и тестирование чувствительности бактерий методом проточной цитометрии

Сабина Нудинг и Лутц Т. Забель

Проточная цитометрия позволяет одновременно анализировать многочисленные параметры эукариотических клеток, а также микроорганизмов, что делает ее мощным инструментом для дифференциации и функционального анализа. Однако применение проточной цитометрии в клинической микробиологии все еще нечасто. Здесь мы сообщаем о разработке проточных цитометрических анализов для обнаружения и идентификации бактерий и определения восприимчивости к антибиотикам. Тестирование восприимчивости широкого спектра бактериальных культурных изолятов было основано на оксоноле DiBAC4(3) и дополнительно модифицировано для возможности тестирования восприимчивости с использованием таких образцов, как посевы крови или мазки. Кроме того, был разработан расширенный анализ для быстрого обнаружения метициллин-
резистентного золотистого стафилококка (MRSA) в течение 6 часов после взятия мазков. Результаты 402 тестов восприимчивости с помощью проточной цитометрии были подтверждены диффузией на агаровых дисках Бауэра-Кирби или автоматизированными системами со средним согласием 94%. Этот анализ принес существенную экономию времени на один день, особенно в отношении расширенных бета-лактамазопродуцирующих бактерий (ESBL). Тестирование восприимчивости, проводимое непосредственно из положительных культур крови или из мазков, еще больше увеличило скорость. Результаты восприимчивости бактериальных штаммов, протестированных непосредственно из культуры крови, достигли соответствия 89% по сравнению с Vitek® 2. Исследование 140 скрининговых мазков пациентов, колонизированных MRSA, и их контактных лиц,
22 мазка были правильно идентифицированы как содержащие MRSA, 2 образца MRSA не были идентифицированы из-за отсутствия экспрессии белка A штаммов MRSA. Ложных классификаций как MRSA-положительных мазков не произошло. Проточная цитометрия предлагает подходящую методику для быстрого обнаружения, идентификации и тестирования восприимчивости бактерий с большим потенциалом.