Клиническая и медицинская биохимия

Абстрактный

Обнаружение и молекулярная характеристика циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) у пациентов с метастатической меланомой: потенциальное применение жидкой биопсии

Суреш М. Кумар

Специфическое для меланомы анти-NG2 антитело, конъюгированное с наночастицами оксида железа, разработанное для выделения, обнаружения и культивирования ЦОК из моделей ксенотрансплантатов меланомы и крови пациентов с метастатической меланомой. Процесс обогащения включал лизис эритроцитов из образцов крови с использованием буфера лизиса эритроцитов, что повышает восстановление раковых клеток путем иммуномагнитной маркировки и разделения. Эффективный захват клеток был подтвержден с использованием флуоресцентно меченых раковых клеток, введенных в здоровую человеческую кровь, а клиническая полезность была продемонстрирована на образцах от пациента с метастатической меланомой. Эксперимент с введением показал более 70% восстановления в четырех наборах экспериментальных. Модель спонтанной метастазирующей меланомы, показала, что количество ЦОК увеличивалось во время прогрессирования опухоли и коррелировало с развитием лимфатических и легочных метастазов in vivo. ЦОК были обнаружены в 6 из 7 образцов крови пациентов, содержащих метастатическую меланому. ЦОК были положительными для специфических молекулярных маркеров меланомы, таких как S100, HMB45, MelaA, MITF, а ЦОК были положительными для окрашивания анти-NG2-Q-dot и pERK2-Q-dot. Паттерн экспрессии гена BRAFV600e привел к тому, что ЦОК были выражены BRAFV600e аналогично контрольным клеткам меланомы. Метод изоляции наночастиц антител оксида железа является высоконадежным и экономически эффективным методом обнаружения ЦОК у пациентов с метастатической меланомой, и клетки ЦОК могут быть культивированы для дополнительных аналитических исследований или потенциального тестирования чувствительности к препаратам.