Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Снижение экспрессии ангиопоэтина 1 на периваскулярных мезенхимальных стволовых клетках у пациентов с ССД вызывает антиангиогенетический эффект при совместном культивировании с эндотелиальными клетками

Паола Ди Бенедетто, Василики Лиакули, Франческо Карубби, Пьеро Русчитти, Онорина Берардикурти, Иления Пантано, Антонио Франческо Кампезе, Эдоардо Алессе, Изабелла Скрепанти, Роберто Джакомелли и Паола Чиприани

Введение: Система ангиопоэтина (Ang)/Tie2 играет важную роль в сосудистых функциях, регулируя взаимодействие эндотелия и перицитов и способствуя стабилизации сосудов. Мы оценили, может ли нарушенное перекрестное взаимодействие при системной склеродермии (ССД) между эндотелиальными клетками (ЭК) и периваскулярными мезенхимальными стволовыми клетками (МСК) влиять на нормальное взаимодействие между Ang1, Ang2 и Tie2, тем самым способствуя нарушению ангиогенеза при ССД.
Методы: Мы исследовали Ang1, Ang2 и их рецепторы, выполняя совместное культивирование с ЭК и МСК костного мозга, полученными от пациентов и здоровых лиц (ЗК). Через 48 часов клетки были отсортированы и проанализированы для молекулярных анализов. Кроме того, мы исследовали с помощью анализа ELISA белки, высвобождаемые в супернатантах. Наконец, мы подавили экспрессию Ang-1 в МСК-ГС с помощью siRNA-Ang1.
Результаты: На молекулярном уровне SSc-MSC, культивируемые отдельно, экспрессировали меньшее количество Ang1 по сравнению с HC-MSC. После совместного культивирования в SSc-MSC/SSc-EC наблюдалось значительное снижение уровней мРНК Ang1. Напротив, SSc-EC экспрессировали более высокие уровни Ang2 и Tie2 в каждом из условий совместного культивирования по сравнению с экспрессией клеток, культивируемых отдельно. Анализы WB и ELISA отразили результаты, наблюдаемые при экспрессии генов. HC-MSC, трансфицированные siRNA-Ang1, не обладали способностью поддерживать формирование трубчатой ​​структуры.
Выводы: В этой работе мы представили доказательства того, что дисбаланс молекул Ang1/Ang2 и сниженная экспрессия их рецептора Tie2 во время взаимодействия ECs-периваскулярных MSC могут модулировать стабильность сосудов и образование сосудистых трубок, тем самым способствуя ангиогенному изменению, наблюдаемому во время SSc.