Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Криоконсервация влияет на функциональность стволовых клеток, полученных из жировой ткани и долгосрочно размножающихся

Али Эль Османи, Сабрина Руам, Анас Аббад, Чайма Эррауи, Сара Харриба, Хасан Букинд, Джалал Нурлил, Габриэль Малка и Лубна Мазини

Цель: Стволовые клетки, полученные из жировой ткани (ADSC), являются менее иммуногенными клетками и имеют гетерогенный профиль секреции цитокинов, что делает их лучшими кандидатами для клеточной иммунотерапии. Даже врожденно или стимулировано, интерлейкин-6 (IL-6) и Toll-подобный рецептор 2 (TLR2), секретируемые ADSC, были модулированы и привели к различным путям воспалительного механизма через секрецию различных воспалительных факторов. Эти свойства могут быть очень полезны при лечении хронических заболеваний, связанных с воспалением. Для использования, расширение ADSC ex-vivo является критически важным вопросом перед трансплантацией или криоконсервацией. Сообщалось о функциональных изменениях клеток во время расширения культуры, которые подвержены взаимодействию с эффектами замораживания/оттаивания, что приводит к сомнениям относительно результатов клеточной терапии. Целью данного исследования является выявление влияния замораживания/оттаивания в различные временные точки расширения культуры на секрецию IL-6 и TLR2.
Методы: ЖСК собирали у молодых женщин-доноров, размножали в культуре и криоконсервировали в сыворотке плода крупного рогатого скота (FBS) и диметилсульфоксиде (ДМСО) после каждого пассажа в течение 6 месяцев-года. Затем ЖСК тестировали на пролиферацию, клоногенность, экспрессию генов цитокинов и оценку перед криоконсервацией (свежие) и после размораживания и культивировали до слияния (замороженные/размороженные). ЖСК, сохраненные на пассаже 0 (P0), размораживали и тестировали после слияния на P1.
Результаты: криоконсервированные ЖСК на P1 показали повышенную клоногенность, общую секрецию РНК и белка по сравнению со свежими. Относительная количественная оценка (RQ) и оценка цитокинов IL-6, IL-10, фактора некроза опухоли (TNF)-α и TLR2 выявили умеренную регуляцию TLR2, в то время как значительно более высокие уровни секреции IL-6 наблюдались в долгосрочно расширенных и криоконсервированных ЖСК.
Заключение: Наши результаты свидетельствуют о том, что криоконсервированные стволовые клетки АСК, длительно размножающиеся в культуре, функционально отличаются и могут иметь нарушенные иммуносупрессивные свойства за счет модуляции воспалительных реакций посредством активации IL-6 и TLR2.