Биохимия и аналитическая биохимия

Абстрактный

Ковалентная иммобилизация лактатоксидазы на гибридной пленке из наночастиц кремния, покрытых циркониевым диоксидом/хитозан для амперометрического определения лактата

Кусум Дагар и Пундир CS

Улучшенный амперометрический биосенсор L-лактата был сконструирован на основе ковалентной иммобилизации лактатоксидазы (LOx) на гибридной пленке из наночастиц кремния с покрытием из циркония (SiO2@ZrONPs)/хитозан (CHIT), электроосажденной на поверхности золотого электрода (AuE). Ферментный электрод был охарактеризован с помощью циклической вольтамперометрии (CV), сканирующей электронной микроскопии (SEM), инфракрасной спектроскопии с преобразованием Фурье (FTIR) и электрохимической импедансной спектроскопии (EIS), в то время как SiO2@ZrONPs были синтезированы методом химического восстановления и охарактеризованы с помощью просвечивающей электронной микроскопии (TEM), УФ-спектроскопии и рентгеновской дифракции (XRD). Биосенсор показал оптимальный отклик в течение 3 с при pH 7,5 в 0,05 М натрий-фосфатном буфере и 30 °C при работе при 20 мВс-1. Биосенсор имел низкий предел обнаружения 0,2 нМ с широким рабочим/линейным диапазоном от 0,1 до 4000 мкМ. Биосенсор использовался для измерения уровня L-молочной кислоты в плазме, по-видимому, здоровых и больных людей. Аналитическое извлечение добавленной молочной кислоты (5,0 мМ и 10,0 мМ)) в плазме составило 99% и 96,6% соответственно. Коэффициенты вариации внутри и между партиями составили 1,79% и 2,89% соответственно. Была обнаружена хорошая корреляция (R2=0,99) между значениями лактата в плазме, измеренными стандартным ферментативным спектрофотометрическим методом и настоящим биосенсором. Ферментный электрод использовался 160 раз в течение 120 дней при хранении в сухом виде при 4°C.