Хасан Дана, Али Мазра, Ганбар Махмуди Чалбатани, Вахид Мармари, Хабиболла Махмудзаде, Али Гамари, Фатеме Моаззен, Мохаммад Эбрахими и Наргес Мехмандуст
Введение: ALCAM как гликопротеин является членом семейства иммуноглобулинов и играет важную роль в росте, выживании и подвижности клеток. Этот белок также способствует развитию инвазии опухоли при колоректальном раке и раке молочной железы и обычно рассматривается как маркер стволовых клеток рака. ALCAM как антиген клеточной поверхности с высокой экспрессией при некоторых видах рака, таких как колоректальный и рак молочной железы, имеет потенциал для диагностики и лечения этих видов рака. Цели: Как и другие мембранные белки, ALCAM представляет собой потенциальную цель для терапии колоректального рака и рака молочной железы, поэтому данное исследование направлено на клонирование и экспрессию доменов C2 и V для использования в практических, диагностических и лечебных планах. Методы: в данном исследовании последовательность доменов C2 и V была оптимизирована для экспрессии в прокариотическом хозяине с использованием онлайн-инструментов и клонирована в плазмидах экспрессии pET-28a. Клетки E. coli BL21 (DE3) были трансформированы рекомбинантными плазмидами pET-28a с использованием метода теплового шока, и экспрессия рекомбинантных доменов V и C2 была исследована с помощью техники SDS-PAGE. Результаты: Синтетические гены доменов C2 и V были расположены между сайтами рестрикции NcoI/BamHI и XhoI и клонированы в вектор pBSK (+). Наличие этих генов в pET28a было определено с помощью колонии и подтверждено рестрикционным перевариванием. Гены доменов C2 и V были экспрессированы в E. coli BL21 DE3. Результаты техники SDSPAGE подтвердили экспрессию рекомбинантных 23 и 29 кДа доменов C2 и V в бактериальной системе экспрессии. Выводы: Гены доменов C2 и V были экспрессированы как рекомбинантные в E. coli. Эти рекомбинантные фрагменты могут быть использованы в качестве диагностических и лечебных кандидатов для скрининга и терапии рака у пациентов с колоректальным раком и раком молочной железы.