Журнал бактериологии и паразитологии

Абстрактный

Характеристика растворимых и мембраносвязанных белков Toxoplasma gondii как диагностических маркеров инфекции

Имен Хаммари, Сами Лахал, Бенуа Вестерманн, Алия Бенкахла, Аида Буратбин, Ален Ван Дорселер, Монсеф Бен Саид, Кристин Шеффер-Рейсс и Фатма Сагруни

В настоящем исследовании мы применили комбинацию одномерного гель-электрофореза, иммуноблота и наножидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии (nanoLC-MS/MS) для идентификации потенциальных иммуногенных белков тахизоитов Toxoplasma gondii , которые могут быть использованы для разработки надежных анализов в серодиагностике приобретенного токсоплазмоза у иммунокомпетентных субъектов. Для этой цели мы разработали иммуноблот с использованием растворимых и мембранных экстрактов тахизоитов GT1 Toxoplasma gondii и протестировали 194 положительных и 100 отрицательных сывороток, полученных от беременных женщин.

Пять полос растворимых антигенов (98 кДа, 36 кДа, 33 кДа, 32 кДа и 21 кДа) и 4 полосы мембранных антигенов (41 кДа, 35 кДа, 32 кДа и 30 кДа) были выбраны как наиболее ценные с точки зрения чувствительности и специфичности. Среди этих полос только 2 полосы растворимого антигена (33 кДа и 32 кДа) и 2 полосы мембранного антигена (32 кДа и 30 кДа) показали специфичность ≥ 90%.

После масс-спектрометрического и биоинформатического анализа было идентифицировано 7 белков в качестве потенциальных маркеров для серодиагностики токсоплазмоза. Это белки: SRS34A, GRA7, GRA1, DG32, MIC5, ROP5 и токсофилин. Эти белки показали 86–100% гомологии с белками штаммов VEG и ME49 T. gondii и 58–87% гомологии с Hammondia hammondi ; и могут рассматриваться как привлекательные кандидаты для разработки иммунохроматографического теста, который можно использовать для быстрой диагностики токсоплазмоза и в качестве подтверждающего теста, когда рутинные методы дают сомнительные результаты.