Журнал мембранных наук и технологий

Абстрактный

Исследование взаимодействия белка фактора XII с роговым слоем человека с помощью терагерцовой визуализации без использования камеры

Зия Шариат-Мадар, Ауник Рахман, Божена Михняк-Кон, Гуачара Да Мотта, Анис Рахман*

В данной статье сообщается об использовании техники терагерцовой визуализации без камеры для измерения конформационных изменений фактора зимогена XII (FXII) в растворе и при связывании с роговым слоем в отсутствие его известного эндогенного потенцирующего комплекса, высокомолекулярного кининогена (HK)-прекалликреина (PK) в режиме реального времени. FXII синтезируется в печени и секретируется в кровоток, выступая в качестве фактора свертывания крови. FXII имеет разнообразные биологические функции. Во-первых, он служит вспомогательной молекулой для продления образования адгезии тромбоцитов, вызванной тромбином, к изначально сформированному монослою тромбоцитов. Во-вторых, FXII обеспечивает надежный стимул для гиперпроницаемости, вызванной брадикинином (BK), путем разрушения сосудистых барьеров. Исследования с использованием анализов in vitro показали, что активация FXII может происходить на отрицательно заряженных поверхностях. Эта активация ускоряется в присутствии калликреина или активированного прекалликреина (PK). Мы демонстрируем наш метод, измеряя конформационные изменения, которые происходят при связывании FXII с роговым слоем. Предмет активации FXII остается в стадии разработки. Ранее терагерцовая сканирующая рефлектометрия (TSR) и терагерцовая спектрометрия (TS) использовались для демонстрации того, что различные отклонения спектральной плотности сигнала обусловлены структурными изменениями и активацией FXII, вызванными гидратированным роговым слоем. В настоящей работе используется терагерцовая (ТГц) визуализация для демонстрации того, что подмножество зимогена FXII связывается с роговым слоем. FXII не накапливался в значительной степени на гидратированном роговом слое. Однако на роговом слое наблюдался сформированный активированный FXII (FXIIa). Это открытие предполагает, что отрицательно заряженная поверхность не является необходимым условием.