Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Критерии оценки биосовместимости новых ксенотрансплантационных материалов: распределение и количественное определение остаточной нуклеиновой кислоты и альфа-гал эпитопа

Насо Филиппо, Агиари Паола, Иоп Лаура, Спина Микеле и Джероза Джино

Цель: Коммерчески децеллюляризованные ксеногенные каркасы в настоящее время используются для заживления больных тканей. Как ни странно, их использование разрешено даже при отсутствии какой-либо оценки устранения ксеногенного клеточного материала, такого как эпитопы альфа-Гал. Кроме того, процедуры децеллюляризации не контролируются для доказательства устранения кальцификационного потенциала, связанного с остатками нуклеиновых кислот. Текущая обработка глутаральдегидом не способна обеспечить полную иммунотолерантность имплантированных ксеногенных тканей, снижая, но не устраняя иммуногенность, особенно для эпитопа альфа-Гал (главное препятствие для успеха ксенотрансплантации). Недавно наша группа подробно сообщила об исследованиях, сосредоточенных на оценке свойств биосовместимости ксеногенных тканей. В этом отчете мы проводим это исследование и обнаружение нуклеиновых кислот в новых ксеногенных тканях, которые показали очень многообещающие доклинические/клинические результаты в различных областях применения. Методы: Количественное определение альфа-Гал проводилось с помощью теста ИФА, ранее разработанного и запатентованного нашей исследовательской группой, который включает использование моноклонального антитела M86 против альфа-Гал. Иммунофлуоресцентный анализ проводился для визуального распределения как ксеногенных эпитопов, так и остатков нуклеиновых кислот. Наконец, для количественного определения общей ДНК был принят коммерчески доступный набор. Результаты: Хотя количество и распределение эпитопов альфа-Гал было обнаружено различным в исследуемых биоматериалах, наличие остатков нуклеиновых кислот было выявлено как общая черта, даже в тех тканях, которые производитель поставлял как бесклеточные. Заключение: Недостаточные количественные оценки, проведенные на доклиническом уровне относительно остаточного содержания ксеногенных эпитопов, детергентов и материалов нуклеиновых кислот в каркасах, привели к разочаровывающим и катастрофическим результатам. Риск повторения этих драматических аварий останется очень высоким, если в производственную практику не будут определены и внедрены параметры безопасности, среди которых полное удаление основных ксеногенных детерминант (альфа-Гал) и остатков нуклеиновых кислот , склонных к кальцификации.