Журнал болезней крови и переливания крови

Абстрактный

Связывание фактора VIII с липидными нанодисками увеличивает его свертывающую функцию в мышиной модели гемофилии А

Кери Ченцитс-Смит, Крил Грушин и Светла Стоилова-Макфи

Предыстория: Гемофилия А — это врожденное нарушение свертываемости крови, вызванное дефектным или дефицитным фактором VIII (FVIII). Активная форма FVIII является кофактором для серинового протеазного фактора IXa (FIXa) в мембраносвязанном внутреннем комплексе теназы (FVIIIa-FIXa). Сборка комплекса FVIIIa-FIXa на активированной поверхности тромбоцитов имеет решающее значение для успешного свертывания крови.

Цели: Охарактеризовать роль липидных нанодисков (ND) для функции FVIII in vivo и протестировать липидные ND в качестве системы доставки FVIII. Оценить потенциал связывания рекомбинантного FVIII с ND в качестве улучшенного лечения гемофилии А.

Методы: Рекомбинантный свиной FVIII (rpFVIII) был экспрессирован и охарактеризован в растворе и при связывании с ND. Комплексы rpFVIII, ND и rpFVIII-ND были охарактеризованы с помощью просвечивающей электронной микроскопии. Функциональные исследования проводились с использованием тестов aPTT и исследований с временным разрешением надрезов хвоста гемофильных мышей.

Результаты: Функциональный rpFVIII был успешно собран на липиде ND. При инъекции гемофилическим мышам комплексы rpFVIII-ND показали выраженный прокоагулянтный эффект, который был сильнее, чем у одного rpFVIII. В то время как инъекция одного ND показала прокоагулянтный эффект, этот эффект не был аддитивным, что подразумевает, что комплексы rpFVIIIIND оказывают синергическое действие на процесс свертывания у гемофилических мышей.

Выводы: Связывание rpFVIII с ND перед его инъекцией гемофилическим мышам значительно улучшает терапевтическую функцию белка. Это представляет собой значимый шаг к новому подходу к модуляции свертывания крови на уровне мембраносвязанного FVIII и сборки внутреннего комплекса теназы.