Журнал микробных и биохимических технологий

Абстрактный

Тест-полоска анти-ЛПС для обнаружения пищевых продуктов, зараженных сальмонеллой и кишечной палочкой

Элвин Ванг, Габриэль Молина, Виктор Прима и Кевин К. В. Ванг

Энтеробактерии, такие как E. coli и Salmonella, выделяют эндотоксин или липополисахарид (ЛПС), который способствует симптомам пищевого отравления. Мы предполагаем, что ЛПС можно обнаружить с помощью простого теста-полоски, тем самым обнаруживая наличие энтеробактерий в пище. Здесь мы описали разработку нового теста-полоски для обнаружения анти-ЛПС. Гибкие полистироловые тест-полоски с абсорбирующей поливинилиденфторидной мембраной, прикрепленной к одному концу, подвергались воздействию различных разведений пищи или источников бактерий. За этим следовала последовательная инкубация с первичным антителом против ЛПС, биотинилированным вторичным антителом и связанным со стрептавидином ферментом щелочной фосфатазой. Затем тест-полоску проявляли субстратом 5-бром-4-хлор-3-индолилфосфатом/нитросиним тетразолием. Таким образом, наличие фиолетового осадка будет указывать на присутствие ЛПС и энтеробактерий. Интенсивность или темнота цвета количественно определялась денситометрически и сравнивалась со стандартной кривой ЛПС. Было показано, что тест-полоска легко обнаруживает очищенный ЛПС в концентрации до 25 нг/мл. Кроме того, тест-полоска анти-ЛПС может чувствительно обнаруживать и количественно определять ЛПС, выделяемый живой кишечной палочкой в ​​питательную среду. Наконец, три группы продуктов питания (ломтики клубники, листья шпината и говяжий фарш) были инокулированы кишечной палочкой в ​​течение двух временных точек при комнатной температуре, а затем промывочная вода от каждого пищевого продукта была подвергнута тесту тест-полоски анти-ЛПС. Для всех трех групп продуктов тест-полоска может легко обнаруживать и количественно определять как 8-часовое, так и 24-часовое бактериальное загрязнение по сравнению с их соответствующими незагрязненными контролями. В заключение был разработан простой прототип теста-полоски анти-ЛПС для легкого обнаружения загрязнения энтеробактериями обычных продуктов питания.