Биохимия и аналитическая биохимия

Абстрактный

Разработка и валидация аналитического метода для определения количественного содержания антибактериальных препаратов бесифлоксацина гидрохлорида и феноксиэтанола в гелевой форме

Прадип Кумар, Нилам Павар*, Неха Миноча, Кавита Бахмани, Аша Пуния

Цель: Целью настоящей работы является разработка аналитического метода и его валидация для определения количественного содержания антибактериального препарата в форме геля.

Предыстория: Валидация аналитического метода — это процесс, включающий исследования, подтверждающие, что процедура/метод/система/аналитик обеспечивает точный и воспроизводимый результат, подтвержденный лабораторными исследованиями, что эксплуатационные характеристики метода соответствуют требованиям, предъявляемым к аналитическим приложениям.

Цель: Улучшить условия и параметры, которые следует соблюдать при разработке и валидации, путем разработки нового чувствительного и точного метода ОФ-ВЭЖХ? Валидация предлагаемых новых разработанных методов в соответствии с аналитическими параметрами, указанными в руководствах IP, USP, BP и ICH.

Методы: Метод ВЭЖХ был проверен, чтобы показать, что используемая аналитическая процедура подходит для предполагаемого использования с использованием различных параметров, таких как специфичность, линейность, предел обнаружения, предел количественного определения, точность, правильность, диапазон, надежность, стабильность аналитического раствора и пригодность системы.

Результаты: Время удерживания для стандарта препарата Бесифлоксацин составило 7,781 мин, а для образца — 7,731 соответственно. Площадь стандарта бесифлоксацина составила 1828547, а площадь образца — 1825315. Анализ образца составил 98%. Время удерживания для стандарта препарата Феноксиэтанол составило 2,010 мин, а для образца — 2,004 соответственно. Площадь стандарта Феноксиэтанола составила 438025, а площадь образца — 438103. Анализ образца составил 97,04%. В пригодности системы относительное стандартное отклонение для 5 повторных инъекций для каждого пика составляет 0,33%. В специфичности пики Разбавителя, Плацебо и Примесей не мешают пикам Бесифлоксацина. Пики Бесифлоксацина оказались чистыми. Было обнаружено, что продукты деградации хорошо отделены от пика бесифлоксацина. Фактор чистоты пика составил NLT 0,9995. В исследовании точности системная точность RSD времени удерживания для бесифлоксацина, полученного из шести повторных инъекций, составила 0,33%. RSD площади бесифлоксацина, полученной из шести повторных инъекций, составила 0,46%. Метод точности RSD был рассчитан на основе 6 определений аналитического значения препарата бесифлоксацин, составило 0,56%. RSD, рассчитанный на основе 6 определений аналитического значения препарата бесифлоксацин, составил 0,50%. В промежуточной точности RSD был рассчитан на основе 6 определений аналитического значения препарата бесифлоксацин, составило 0,50%. RSD, рассчитанный на основе 12 определений (точность метода и промежуточная точность) аналитического значения, составило 0,50%. Стабильность в аналитическом растворе для стандарта и образца, разница площади пика бесифлоксацина оказалась в пределах ± 2,0% от исходной линейности. Коэффициент корреляции и коэффициент регрессии (R-квадрат) должны быть не менее 0,995 для бесифлоксацина. Коэффициент корреляции составляет 0,998. Коэффициент регрессии составляет 1,000. % пересечения должен быть в пределах ± 5,0% от ответа на уровне 100%. Точность на уровне 50% и 150%: RSD составляет 0,01%. Точность на уровне 50% и 200%: RSD составляет NMT 2,0%. Среднее значение точности % восстановления на каждом уровне оказалось в пределах от 98 до 101% препарата бесифлоксацин. RSD по 9 (3 уровня x3) определениям составляет 1,2, что соответствует критериям диапазона NMT 2%. Для параметров точности и линейности корреляция составила 1,0%.

Заключение: Извлечение находится в пределах от 98% до 101%, а % RSD для всех значений извлечения составляет 1,41%, что находится в пределах. В методе ВЭЖХ условия были оптимизированы для получения адекватного разделения элюированных соединений.