Журнал биоэквивалентности и биодоступности

Абстрактный

Системный подход к преодолению матричного эффекта во время анализа ЖХ-ЭСИ-МС/МС с использованием различных методов извлечения образцов

Чинмой Гош, Шашанк Гаур, Чандракант П. Шинде и Бхасват Чакраборти

Эффект матрицы (ME) является основной проблемой во время любого анализа LC-ESI-MS/MS. Он влияет на воспроизводимость, чувствительность и надежность этих аналитических методов. Однако не существует стандартизированных подходов для преодоления проблем, связанных с ME. Подход варьируется от молекулы к молекуле. Здесь мы рассмотрели, что метод извлечения образца является подходом для преодоления ME во время биоанализа LC-MS/MS. Три типа обычных методов экстракции, а именно осаждение белка, экстракция жидкость-жидкость и экстракция твердой фазы (SPE), использовались при извлечении невирапина из плазмы человека. Было отмечено, что образец невирапина, приготовленный с помощью SPE, устраняет или значительно снижает ME ipso facto. Образцы, осажденные белком, показали самую высокую степень ME со средним матричным фактором 0,30; экстракция жидкость-жидкость имела средний матричный фактор 0,80; а матричный фактор, полученный с помощью экстракции твердой фазы, составил 0,99. Различные фосфолипиды были идентифицированы путем выполнения сканирования ионов-предшественников при m/z 104 и 184, которые мешали аналиту во время хроматографического элюирования. В ходе эксперимента было отмечено, что долго удерживаемые фосфолипиды играли значительную роль в МЭ. Поэтому хорошей практикой является наблюдение за фосфолипидами во время сканирования прекурсоров в течение периода, который по крайней мере в три раза превышает фактическое время аналитического выполнения. Среди всех применяемых методов экстракции твердофазная экстракция дает самый чистый образец, а осаждение метанолом дает самый грязный образец из-за высокой растворимости в нем фосфолипидов.