Журнал бактериологии и паразитологии

Абстрактный

Простой метод визуального обнаружения вируса Зика у человека с использованием изотермической амплификации, опосредованной обратной транскрипционной петлей

Ян Ли1,2, Чжэньчжоу Вань3, И Чжоу2,4, Ся Цзинь5, Хайфэн Ши1* и Чиюй Чжан 2*

Вирус Зика (ZIKV) — это новый возбудитель, переносимый комарами, и принадлежит к семейству Flaviviridae, роду Flavivirus. Инфекция ZIKV была связана с микроцефалией и мужским бесплодием. Наблюдение за инфекцией ZIKV важно для репродуктивного здоровья человека и контроля распространения вируса. Разработка быстрого и чувствительного анализа для обнаружения ZIKV срочно необходима для Китая и других стран Юго-Восточной Азии. Здесь мы разработали одноэтапный анализ с однопробирочной обратной транскрипционной петлевой изотермической амплификацией (RT-LAMP) для обнаружения ZIKV. Анализ имеет предел обнаружения (LOD) 88 копий РНК Зика на 25 мкл реакции и может быть завершен в течение 20 минут, когда ввод шаблона превышает LOD. Кроме того, он демонстрирует высокую специфичность и хорошую воспроизводимость. Важно, что результат можно визуализировать с помощью колориметрического изменения при использовании HNB или кальцеина. Для оценки жизнеспособности анализа было проведено сравнение между анализом RT-LAMP и более конверсионным RT-qPCR с использованием 20 супернатантов клеточных культур и трех образцов мочи. ZIKV RT-LAMP показал идеальное соответствие в обнаружении с RT-qPCR. Эти результаты показывают, что недавно разработанный ZIKV RT-LAMP прост, быстр и хорошо подходит для наблюдения за ZIKV, особенно в регионах с ограниченными ресурсами.