Генная технология

Абстрактный

Быстрый анализ ПЦР в реальном времени для вариантов гена CYP2C19 для оптимизации использования клопидогреля и других антитромбоцитарных препаратов у пациентов со стентированием коронарных артерий

Кхандрика Л., Парсам В., Махалингам М., Мусмури С.Г., Нандан У., Данге С., Саху П.К., Рат ПК и Джайн Дж.

Введение: Клопидогрель является наиболее часто назначаемым антитромбоцитарным препаратом в сочетании с аспирином после чрескожного вмешательства на сердце (ЧКВ). Однако известно, что реакция на клопидогрель у пациентов сильно варьируется, поскольку биодоступность зависит от превращения пролекарства в фармакологически активную форму клопидогреля. Это превращение зависит от активности нескольких печеночных ферментов семейства цитохрома P450, из которых CYP2C19 играет центральную роль. Ключевые мутации в этом гене вызывают либо потерю функции, либо усиление функции CYP2C19, что в конечном итоге приводит к изменению реактивности тромбоцитов у человека. Риск был сочтен достаточно высоким, поэтому FDA добавило к лекарству «предупреждение в рамке», предостерегая медицинских работников от использования лучшей доступной информации для лучшего лечения пациентов. Поэтому определение генотипа человека перед приемом клопидогреля необходимо для достижения его оптимальной антитромбоцитарной активности. Методы: Образцы крови были собраны у согласившихся пациентов после того, как они находились на поддерживающей дозе антитромбоцитарной терапии. Был разработан новый аллель-специфический ПЦР-анализ в реальном времени для идентификации специфических мутаций в гене CYP2C19. Метод ПЦР в реальном времени с использованием SYBR green был проверен по сравнению с обычным методом RFLP, описанным ранее, и использовался для определения частоты и типа мутаций в популяции пациентов после ЧКВ. Результаты: Метод ПЦР в реальном времени был быстрее и экономически эффективнее при идентификации вариантов гена CYP2C19. Новый метод был сопоставим с обычным методом RFLP. Результаты исследования указывают на высокую распространенность мутаций, которые могли бы изменить нормальную функцию гена CYP2C19 у большинства индийского населения. Выводы: На основании высокой частоты мутаций, присутствующих у индийских пациентов после ЧКВ, мы заключаем, что генотипированный вариант CYP2C19 предоставляет прекрасную возможность для оптимизации режима антитромбоцитарной терапии после ЧКВ.