Журнал микробных и биохимических технологий

Абстрактный

Высокочувствительная гнездовая ПЦР для обнаружения Toxoplasma gondii в образцах животных и пищевых продуктов

Мария Витале, Паола Галлуццо, Виттория Курро, Катарина Годжик, Доменико Скиллачи и Винченцо Ди Марко Ло Прести

Toxoplasma gondii — это основной паразит, передающийся через пищу и воду во всем мире. Ткани и образцы мяса многих теплокровных животных могут содержать цисты тканей от хронического токсоплазмоза. Вода и овощи могут быть загрязнены паразитическими ооцистами, выделяемыми через фекалии инфицированных кошек, представляющих собой окончательного хозяина паразита.

Описана чувствительная ПЦР для обнаружения Toxoplasma gondii. На первом этапе была амплифицирована область между 28S и 18S рДНК в близкородственных T. gondii и Neospora caninum; анализ RFLP позволил отличить ДНК от двух морфологически идентичных паразитов. Хотя N. caninum не участвует в передаче человеку, до сих пор он важен для здоровья животных, поскольку является основным виновником абортов у крупного рогатого скота.

Вложенная ПЦР использовалась в анализе разбавления в образцах свиной колбасы, в которые была добавлена ​​паразитарная ДНК T. gondii. Анализ показал, что можно обнаружить до 200 фг, эквивалентных только двум отдельным паразитам. Аналогичный предел обнаружения для T. gondii может быть получен с помощью ПЦР в реальном времени, но методы в реальном времени требуют специальных расходных материалов и дорогостоящего оборудования.